1494-98 yılları arasında resmedilmiş Da Vinci’nin bir diğer şaheseri The Last Supper (Son Akşam Yemeği), İncil’in en ünlü sahnelerinden birini gösteriyor. Diğer sanat eserlerinin aksine müzede değil, Milano’da bulunun Santa Maria Delle Grazie isimli bir manastırın duvarını kaplayarak ziyaretçilere görsel bir şölen sunuyor. Eserin bu kadar önemli olmasının sebepleri arasında İsa ve cennetin üst katlarındaki diğer havarileri ile verilen son defa yenilecek yemeği görselleştiriyor olması verilebilir. Eserle ilgili bir diğer tuhaf ve oldukça tartışmalı olan durum ise tabloda herhangi bir kadın figürüne rastlanmaması. İsa’nın sağ tarafındaki kişinin cinsiyet tartışmaları defalarca işlenmiş olsa bile kesin olarak bir şey söylemek mümkün değil.